简约风医学科研机制流程图插画素材

请生成一张适合A4页面的竖版技术路线图。各模块之间逻辑清晰、衔接自然，学术配色，结构紧凑。只输出完整的技术路线图内容。主题为“外源性乳酸调控糖酵解-H3K18la轴影响Tfh细胞分化及在SLE中的机制研究”。图表包含三个模块从上到下排列：模块1（顶部）：表型验证。 ①体外Tfh分化：人/鼠naïve CD4+ T细胞磁珠分选，Tfh极化加乳酸，流式检测Tfh比例、ICOS、Bcl6，CFSE/Annexin V检测增殖凋亡；②体内SRBC免疫：小鼠SRBC免疫+乳酸钠，流式检测Tfh/GCB；③组织/细胞内乳酸检测：收集脾脏及极化Tfh细胞，试剂盒测定乳酸浓度。模块2（中部）：机制探索。 ①糖酵解代谢：Seahorse检测ECAR/OCR，Western blot测PKM2/HK2及PI3K-Akt-mTOR，¹³C-葡萄糖示踪+LC-MS测代谢物，鱼藤酮恢复后流式测Tfh；②H3K18la修饰：CUT&Tag-qPCR测靶基因富集，CUT&Tag-seq+RNA-seq整合，抑制剂/siRNA筛选关键酶，ChIP-qPCR/RT-qPCR验证；③细胞状态依赖性：乳酸时间梯度测胞内乳酸和H3K18la，胰岛素/2-DG代谢切换后流式测Tfh；④乳酸转运：FITC-乳酸示踪摄取动力学，共聚焦观察分布及共定位，WB测MCT1，AZD3965抑制实验，Bm12小鼠注射FITC-乳酸后流式测T细胞摄取。模块3（底部）：治疗验证。 ①临床样本：SLE患者及对照血清/PBMC，检测乳酸、糖酵解活性、PKM2/HK2、mTOR、H3K18la、MCT1，与SLEDAI/尿蛋白相关性；②动物模型：Bm12狼疮小鼠六组（对照、乳酸钠、AZD3965、MS-275、乳酸钠+AZD3965、乳酸钠+MS-275），检测抗dsDNA、尿蛋白、肾脏病理、脾脏Tfh H3K18la；③机制与安全：分离脾CD4+ T细胞测糖酵解、H3K18la、Tfh基因，检测血清抗dsDNA、肾脏病理评估免疫毒性。连接元素：使用箭头连接模块。把其中的module去掉