扁平化科研风医学免疫实验流程插画素材

text中文提示词：请生成一张技术路线图，风格参考图1.2。主题为“外源性乳酸调控糖酵解-H3K18la轴影响Tfh细胞分化及在SLE中的机制研究”。图表包含三个主要模块，从上到下排列：模块1（顶部）：“外源性乳酸对Tfh细胞分化的抑制作用验证”子项：①体外Tfh分化模型：人/鼠naïve CD4+ T细胞磁珠分选，Tfh极化培养（抗CD3/CD28+IL-6+IL-21+IL-12+TGF-β），乳酸（10 mM）处理5天；流式检测Tfh比例（CXCR5+PD-1+）及ICOS/Bcl6表达；CFSE标记检测增殖指数；Annexin V/PI检测凋亡率。②体内SRBC免疫模型：C57BL/6J小鼠SRBC免疫，皮下注射乳酸钠（1.68g/kg/d），第7天脾脏流式检测Tfh和生发中心B细胞比例。③组织/细胞内乳酸检测：收集SRBC/Bm12小鼠脾脏及体外极化Tfh细胞，乳酸试剂盒测定浓度。图标建议：细胞培养皿、流式细胞仪、小鼠、组织匀浆、乳酸分子。模块2（中部）：“外源性乳酸调控糖酵解-H3K18la轴分子机制及细胞状态依赖性解析”子项：①糖酵解代谢分析：Seahorse检测ECAR/OCR；Western blot检测PKM2/HK2及PI3K-Akt-mTOR通路；¹³C-葡萄糖示踪+LC-MS检测代谢物（G6P/FBP/PEP/丙酮酸/乳酸）；鱼藤酮恢复实验。②H3K18la修饰调控分析：CUT&Tag-qPCR检测靶基因（Bcl6/Icos/Pkm2/Hk2）启动子区富集；siRNA筛选p300/HBO1/HDAC1-3；过表达/抑制关键酶后ChIP-qPCR和RT-qPCR验证；RNA-seq与CUT&Tag整合分析。③细胞状态依赖性分析：乳酸处理不同时间（0-5d）检测胞内乳酸和H3K18la；胰岛素+高糖诱导naïve T细胞，2-DG处理Tfh细胞后加乳酸检测Tfh比例和H3K18la。④乳酸转运分析：FITC-乳酸处理naïve/Tfh细胞，流式检测摄取动力学，共聚焦观察亚细胞分布及与H3K18la共定位；流式/WB检测MCT1/4表达；AZD3965干预；Bm12小鼠尾静脉注射FITC-乳酸检测脾脏T细胞亚群摄取。图标建议：Seahorse、Western blot、质谱、DNA双螺旋、酶、qP